序文 1
编译者之序言 3
1.进行植物组织培养所需要的准备及基本知识 1
1-1 器具之冲洗 2
a.使用铬硫酸溶液的方法 2
b.使用清洁剂的方法 3
c.超音波冲洗法 4
d.玻璃器具之保管 5
1-2 实验器具之灭菌 5
a.乾热灭菌法 5
b.高压灭菌法(autoclaving) 6
1-3 培养基之配方 8
a.贮藏溶液(MS培养基) 8
b.培养基之配制法 11
c.添加物 12
1-4 无菌操作 15
a.材料植物之灭菌 15
b.基本无菌操作 17
2.愈伤组织之诱发、继代培养 19
2-1 胡萝蔔 19
a.诱发愈伤组织 20
b.继代培养 21
2-2水稻 23
a.诱发愈伤组织 24
b.继代培养 25
2-3 松树类之愈伤组织培养 26
a.种子之杀菌及发芽 28
b.诱发愈伤组织 29
2-4 杉树之愈伤组织培养法 31
a.种子 31
b.茎顶 32
3.由愈伤组织中再生植物体的方法 35
3-1 菸草 35
3-2 胡萝蔔 38
3-3 水稻 42
4.液体培养法 45
4-1 长春花细胞之同步培养 45
4-2 胡萝蔔细胞之分批培养(batch culture) 50
a.液体(悬浮)培养之诱发 51
b.液体培养之继代(继代培养) 51
c.分批培养细胞之增殖及增殖量之测定 52
5.单细胞培养 55
5-1 单细胞游离法 55
5-2 钧出单细胞的方法 57
5-3 微量培养(microculture) 58
a.微量培养(1) 58
b.微量培养(2) 59
5-4 哺育培养(nurse culture,minr氏法) 61
5-5 饲养层(feeder layer)法 63
6.原生质体之单独分离、培养法 65
6-1 菸草(叶) 65
6-2 黄豆(培养细胞) 70
6-3 玉米叶肉细胞和维管束鞘细胞之分离 73
7.根端培养法(水稻) 81
a.种子之杀菌 83
b.种子之无菌发芽 84
c.插秧 84
d.培养 84
8.胚芽、胚珠、子房培养法 87
8-1 柑橘类(胚芽) 87
a.实验材料之杀菌操作及准备 89
b.胚芽之取出 89
c.胚芽之种植 89
d.种植後之管理 90
e.种植至花盆 90
8-2 菸草(胚珠) 91
8-3 子房培养法 94
9.试管内受粉法(菸草) 99
10.体细胞杂交法 103
10-1 细胞融合法 103
10-2 杂种细胞之选拔 108
10-3 植物体之再生 110
11.遗传工程学 113
11-1 土壤杆菌Ti质粒之利用 113
a.抽取出Ti质粒的方法 115
b.冠症瘤组织之无菌培养法 117
11-2 细菌及其球状原生质体(soheropladt)之利用 118
11-3 遗传迅息之摄入 124
a.配制原生质体 126
b.使用TMV-RNA而进行的原生质体转入 126
c.是否导致原生质体转导之检验 127
12.细胞选拔法 131
12-1 利用突变的方法 131
a.照射γ射线而诱发突变 132
b.利用化学物质而诱发突变 132
c.利用自然突变的方法 133
12-2 用胺基酸类似物的抵抗性细胞株之选拔 135
12-3 耐盐性植物株之选拔 140
12-4 抗病性 144
12-5 耐低温性 146
12-6 光自营营养 148
13.花药培养法 153
13-1 水稻 153
13-2 马铃薯 157
14.花粉培养法(菸草) 163
a.花药之前培养 164
b.用蒸馏水所进行的花药之前培养 166
15.茎顶培养法 167
a.芽之杀菌 169
b.解剖、种植 169
c.培养、继代 170
d.发根 170
16.无病毒植物之培育 173
16-1 康乃馨(荷兰石竹,Dianthrs caryophyllus L.) 173
16-2 马铃薯(Solanum tuberosum L.) 178
16-3 草莓(荷兰草莓,Fragaria chiloensisi Duch var.ananassa Bail) 182
16-4 病毒之检验法 186
a.康乃馨之病毒检验法 187
b.马铃薯之病毒检验法 188
c.草莓之病毒检验法 188
17.大量增殖法 191
17-1 兰花之生长点培养 191
a.卡特来兰之生长点培养 191
b.舟兰(Cymbidium)属,钩兰(Oncidium)属及Miltonia属之生长点培养 196
17-2 大丁草(gerbera)之生长点培养 199
17-3 百合花之生长点培养 205
17-4 苹果之生长点培养 209
a.幼苗增殖 210
b.发根 211
c.种植於花盆·驯化 211
18.生长点之冷冻保存法 213
a.阶段式冷冻法 215
b.连续冷冻法 217
19.大量培养法 221
20.物质生产 227
20-1 鸦片生物硷 231
20-2 皂角苷(saponin)(高丽人参皂角苷,ginsenocide) 232
20-3 泛醌-10(ubiquinone-10) 238
20-4 酚(phenol)(花色素苷,anthocyanin) 242
21.物质转换 247
21-1 毛地黄毒苷配基(digitoxigenin) 247
21-2 并用辐射性同位素的转换实验例 250
21-3 生物硷(reyiculine),可待因转换实验 257
a.诱发愈伤组织 259
b.(R、S)-reticuline工转换 259
c.转换codeinone实验 262
22.生物合成 265
22-1 生物合成酚(echinatine)之实验例 265
22-2 类固醇(steroid)及类三萜烯 272
23.酵素 277
23-1 葡萄糖基转移酶(glucosyltransferase) 277
23-2 甲基转移酶(methyltransferase) 285
参考文献 293
附表1 主要培养基之无机盐组成表 309
附表2 维生素及其他微量有机物质之组成表 311
附表3 胺基酸混合物之组成表 312
索引 313